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原代心肌细胞分离、培养与成像

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什么是原代心肌细胞?

  • 原代心肌细胞是直接从动物心脏组织中分离获得的心肌细胞,保留了天然的电生理、生化与结构特征,常用于心血管药理、毒理与离子通道功能研究。
  • 与永生化细胞系不同,原代心肌细胞更加接近体内生理状态,是评估药物对心脏功能影响的重要模型。

心肌细胞分离与培养的挑战

  • 心肌细胞对机械与酶解操作高度敏感,分离过程需精准控制消化时间与温度。
  • 成年心肌细胞难以贴壁生长,且体外存活时间有限,需优化培养基配方与接种密度。
  • 高纯度、高活性的细胞制备依赖专业经验与完善的无菌操作体系。

心肌细胞的高内涵与共聚焦成像分析

  • 利用高内涵成像可分析心肌细胞收缩状态、线粒体功能、钙信号动力学等指标。
  • 共聚焦显微镜可高分辨率观察心肌结构蛋白(如 α-actinin、troponin)、肌节排列及药物诱导的超微结构变化。
  • 结合荧光标记的通道蛋白或受体,可用于药物作用机制的可视化评估。
成像图1 成像图2
Figure: Confocal images of two isolated cardiomyocytes stained for cardiac troponin T (cTnT, magenta) and nuclei (DAPI, blue). The images show clear sarcomeric striation patterns and two distinct nuclei, consistent with a mature, multinucleated cardiomyocyte morphology.

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